تعیین میزان ازت با روش کجلدال
پروتئینها ترکیبات آلی پیچیدهای هستند که وزن مولکولی زیادی بین پانصد تا چند میلیون دارند. ساختمان آنها عموما از 53% کربن، 23% اکسیژن، 16% نیتروژن یا ازت، 7% هیدروژن و کمتر از 1% گوگرد و فسفر تشکیل شده است. درارزیابی کیفیت پروتئین موجود درمواد غذایی، معمولا از اندازهگیری پروتئین خام استفاده میشود.
رایجترین روش برای اندازهگیری کل ازت موجود درخوراک و به تبع آن محاسبه پروتئین خام، روش کجلدال است،که برای اولین بار در سال 1883 توسط دانشمند دانمارکی بهنام کجلدال ارائه گردید و تاکنون از این روش برای تعیین میزان ازت استفاده میشود. در روش کجلدال، اندازه گیری ازت کل به سه مرحله کلی هضم، تقطیر ،و تیتراسیون تقسیم بندی میگردد.
به منظور برآورد درصد ازت، ابتدا نمونه مورد نظر را توسط اسید سولفوریک هضم نموده، و ازت موجود به صورت سولفات آمونیوم تبدیل میگردد. سپس ازت موجود در سولفات آمونیوم را به صورت آمونیاک آزاد و توسط اسیدبوریک به بورات آمونیوم تبدیل نموده و با استفاده از اسیدسولفوریک1/ . نرمال آن را تیتر مینماییم و آنگاه با محاسبه اسید مصرفی مقدار ازت بدست میآید.
هضم:
مقداری از نمونه مورد نظر را داخل کاغذ صافی و یا کاغذ سیگار ریخته و وزن نمونه (W) را یاداشت میکنیم، قابل ذکر است، میزان نمونه به درصد پروتئین رابطه مستقیم دارد. جهت تسریع در عملیات هضم، از مخلوط کاتالیز سولفات مس و سولفات پتاسیم (به نسبت 1به10) اضافه میکنیم.
بعد از افزودن اسید سولفوریک، لوله را در دستگاه هضم قرار داده و دمای دستگاه را به صورت صعودی تا دمای 300 افزایش میدهیم. جهت انجام آزمایش، مدت 5/2 الی 24 ساعت مورد نیاز است.و رنگ سبز مایل به آبی یا سفید محلول، نشان دهنده اتمام واکنش هضم است.
تقطیر:
محلول بدست آمده از مرحله هضم را بعد از سرد شدن با مقداری آب مقطر رقیق کرده و در یک سمت دستگاه تقطیر قرار میدهیم، در سمت دیگر دستگاه ظرفی حاوی اسید بوریک 2% و معرفهای قرمز و سبز را نیز قرار داده و به آرامی مقداری محلولNaOH را به لوله هضم اضافه میکنیم.
افزودن NaOH به محلول، باعث متصاعد شدن گاز آمونیاک شده و بعد از انجام عملیات تبرید، آمونیاک مایع وارد ظرف بوریک اسید میشود. زمانی که تغییر رنگ از قرمز به سبز مشاهده شد، بورات آمونیوم حاصل گردیده است.
درآخر جهت اطمینان، لولههای دستگاه را با آب مقطرشستشو میدهیم.
تیتراسیون:
در این مرحله اسید سولفوریک 1/ . نرمال را به صورت قطره ای از طریق لوله مدرج بورت به محلول بورات آمونیوم ( )اضافه میکنیم. زمانی که محلول از رنگ سبز به قرمز تغییررنگ داد، حجم اسید مصرفی(V)را در نظر میگیریم. درصد ازت موجود در نمونه از طریق ذیل محاسبه میگردد:
در این راستا شرکت فرآزما، با بیش از 20 سال پیشینه درخشان، ارائه دهنده انواع دستگاههای مورد نیاز جهت تعیین میزان پزوتئین خام مواد غذایی ازجمله دستگاه کجلدال و تقطیر اتوماتیک، ودستگاههای هضم به همراه هود و اسکروبر .است.
شایان ذکر است شرکت فرآزما تحقیق نماینده انحصاری کمپانی HANON در ایران میباشد.
مشاهده انواع دستگاه های کجلدال و اطلاعات فنی دستگاه ها